A spektrofotométer egy spektroszkópos eszközön keresztül több hullámhosszú fényforrást képes előállítani, amely egy meghatározott fényforrás hullámhosszat eredményez, a fény a tesztmintákon keresztül, a fény egy része elnyelődik, kiszámítja a minta abszorbancia értékét, amelyet a minta koncentrációja. Az abszorbanciaérték mintái a minta koncentrációjával arányosak.
A monokromatikus fénysugárzás a vizsgált oldatban, az anyag által elnyelt mennyiség és az anyag koncentrációja, valamint a folyadékréteg vastagsága arányos az optikai út hosszával, a kapcsolat a következő:
A=- lg (I / I).=- lgT=kLc
Típus: A, az abszorbanciához.
I. a beeső fény intenzitására;
I a fényintenzitás átadására;
T az anyagok áteresztőképességére;
K mint moláris abszorpciós együttható;
L a fizikai optikai utat elemzi, nevezetesen a kolorimetrikus csésze oldalhosszát;
C az anyag koncentrációja;
Az anyag szelektív fényelnyelési hullámhossza, és a megfelelő abszorpciós együttható az anyagállandók. Ha bizonyos körülmények között ismert tiszta anyag rendelkezésre áll, miután a vizsgálati minták abszorpciós együtthatója ugyanazon körülmények között, mint az oldat, akkor mérjük meg annak abszorbanciáját a típusvizsgálati mintákból az anyag tartalmában. A látható fénytartományban a fényelnyelés bizonyos anyagok mellett sok anyag önmagában nem szívódik fel, de egyes körülmények között, vagy feldolgozás után újra csatlakozhat a kromogén reagenshez, így színmérését ismét elvégezzük, ezért kolorimetriás elemzésnek is nevezzük. Mivel a színmélységet befolyásoló kromogén tényezők többek, amikor a gyenge és gyakran monokromatikus fénytisztaságú műszert használ, ezért a standard anyag és a referenciaanyag egyidejű alkalmazásának meghatározása.
